Aanvankelijk werd Mickey Mouse gekenmerkt door zijn eenvoudige, ronde figuur en grote ogen. Iwerks bracht aanzienlijke verfijning aan in Mickey's ontwerp en introduceerde subtiele veranderingen die zijn persoonlijkheid en expressiviteit versterkten. Hij accentueerde Mickey's oren en voegde zwarte cirkels aan zijn ogen toe, waardoor het personage een onderscheidend en vertederend uiterlijk kreeg.
Iwerks speelde ook een cruciale rol bij de ontwikkeling van de vroege Mickey Mouse-animaties. Hij was een pionier op het gebied van innovatieve technieken zoals "rechtdoor" en "pose-to-pose" -animatie, die een grotere vloeiende beweging en een meer dynamische weergave van het personage mogelijk maakten. Zijn baanbrekende bijdragen hebben ertoe bijgedragen dat Mickey Mouse een geliefd icoon en een wereldwijd cultureel fenomeen werd.