Aloysia Weber werd op 12 november 1760 geboren in Zell im Wiesental, in de regio van het Zwarte Woud in Duitsland. Haar vader, Fridolin Weber, was muzikant en muziekleraar, en haar moeder, Cäcilia Weber, was zangeres. Aloysia toonde al vroeg talent in muziek en ze begon piano en zang te studeren bij haar vader.
In 1777 verhuisden Aloysia en haar familie naar München, waar ze op 17-jarige leeftijd haar podiumdebuut maakte. Ze werd al snel een succesvolle operazangeres en speelde hoofdrollen in opera's van Mozart, Gluck en andere componisten.
In 1780 ontmoette Aloysia Wolfgang Amadeus Mozart, die toen in München woonde. Mozart was meteen verliefd op Aloysia en hij componeerde verschillende aria's voor haar. De twee waren verloofd om te trouwen, maar de verloving werd in 1781 afgebroken.
Aloysia bleef met succes optreden als operazangeres tot 1790, toen ze zich terugtrok van het podium. Ze trouwde in 1795 met Joseph Lange, een hofmuzikant. Het echtpaar kreeg twee kinderen, een zoon en een dochter.
Na haar pensionering wijdde Aloysia Weber zich aan het lesgeven in muziek. Ze gaf piano- en zangles aan studenten van alle leeftijden en was jarenlang een gerespecteerde muziekleraar in Wenen. Zij stierf in Wenen in 1839.