* Groene Goblin (Norman Osborn) :Dit is de hoofdschurk en is vanaf het begin speelbaar.
* Nieuwe Goblin (Harry Osborn) :Je ontgrendelt Harry als speelbaar personage door de verhaalmodus van het spel te voltooien.
Er zijn geen andere speelbare goblins in het spel.
Het is belangrijk op te merken dat Spider-Man 3 (2007) een game voor één speler is . Er zijn geen multiplayermodi waarin je nieuwe personages kunt ontgrendelen.