originele run (1954-1967):
* Steve Allen (1954-1957)
* Jack Paar (1957-1962)
* Johnny Carson (1962-1992)
Huidige run (1992-present):
* Jay Leno (1992-1993, 1995-2009, 2010-2014)
* Conan O'Brien (1993-1995, 2009-2010)
* Jimmy Fallon (2014-heden)
Andere opmerkelijke hosts:
* Arnold Stang (kort ingevuld voor Jack Paar in 1958)
* Hugh Downs (Georganiseerde de vrijdagavond -editie van The Tonight Show in 1967)
* David Letterman (organiseerde een speciale editie van The Tonight Show in 1978)
Het is vermeldenswaard:
* Steve Allen was de allereerste gastheer van de Tonight Show.
* Johnny Carson wordt algemeen beschouwd als de meest iconische gastheer, die de positie 30 jaar bekleedt.
* Jay Leno Hostte de show in totaal 22 jaar, opgesplitst in twee stints.
* De Tonight Show heeft in zijn geschiedenis verschillende namen gehad, waaronder de Tonight Show met in de hoofdrol Johnny Carson, The Tonight Show met Jay Leno en The Tonight Show met Jimmy Fallon.