De ark wordt beschouwd als het heiligste relikwie van de Israëlieten en werd bewaard in het Heilige der Heiligen, het binnenste heiligdom van de Tabernakel. Volgens het boek Exodus was de ark gemaakt van acaciahout en van binnen en van buiten bedekt met puur goud. Het had een gouden kroon rond de bovenrand en vier gouden ringen aan de vier hoeken. Twee vergulde houten palen werden aan één kant door de ringen gestoken en gebruikt om de ark te dragen. De ark had ook een verzoendeksel, of deksel, gemaakt van puur goud, waarop twee gebeeldhouwde gouden cherubs naar elkaar toe gericht waren met hun vleugels tegen elkaar. en overschaduwt het verzoendeksel.
De ark speelde een cruciale rol in de reis van de Israëlieten door de wildernis. Men geloofde dat het de woonplaats van God op aarde was en vergezelde de Israëlieten tijdens hun omzwervingen. Elke keer dat ze hun kamp opsloegen, werd de ark in de tabernakel geplaatst, en als ze verder trokken, droegen de priesters de ark, bedekt met een doek, vooraan in de processie.
De aanwezigheid van de ark bracht de Israëlieten bijzondere gunst en bescherming. Telkens wanneer de ark ten strijde werd getrokken, versloegen de Israëlieten hun vijanden. Toen de Ark echter door de Filistijnen werd buitgemaakt, werden ze getroffen door plagen en moest de Ark worden teruggegeven. De ark ging later verloren tijdens de plundering van Jeruzalem door Nebukadnezar in 587 v.Chr. en is sindsdien niet meer gezien.
De verblijfplaats van de Verloren Ark is al eeuwenlang het onderwerp van speculatie en fascinatie. Er zijn talloze pogingen geweest om de Ark te vinden, maar geen enkele is succesvol geweest. Sommigen geloven dat de ark is vernietigd, terwijl anderen speculeren dat deze mogelijk verborgen is in grotten of ondergrondse kamers in Jeruzalem of elders. De verdwijning van de Ark heeft ook geleid tot talloze legendes, verhalen en zelfs Hollywood-films.