De Globe was voornamelijk van hout gemaakt en had een diameter van ongeveer 30 meter. Het had een rieten dak en een capaciteit van ongeveer 3.000 toeschouwers. Het podium bevond zich aan het ene uiteinde van het theater en werd op de binnenplaats geprojecteerd, waardoor een nauwe en intieme relatie tussen de acteurs en het publiek mogelijk was. De binnenplaats, of put, was waar het grootste deel van het publiek stond, terwijl de rijkere klanten in galerijen rondom het podium zaten.
Het Globe Theatre werd niet alleen gebruikt voor theaterproducties, maar ook voor andere vormen van amusement, zoals berengevechten en zwaardvechten. Het was een populaire locatie voor het Londense publiek, en de toneelstukken van Shakespeare waren daar bijzonder succesvol. De Globe was echter ook een doelwit voor kritiek en controverse, vanwege de associatie met gokken, prostitutie en andere, minder hartige activiteiten.
In 1613 werd het Globe Theatre door brand verwoest tijdens een uitvoering van Shakespeares toneelstuk Henry VIII. Het theater werd in 1614 herbouwd, maar werd in 1642 door de puriteinen gesloten. Het werd uiteindelijk in 1644 afgebroken.
Het moderne Globe Theatre, gelegen nabij de oorspronkelijke locatie in Southwark, is een reconstructie van het oorspronkelijke theater en wordt gebruikt voor openbare uitvoeringen van toneelstukken van Shakespeare.